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摘 要：目的：研究复方降脂宁对实验性高脂血症小鼠血脂和肝脏脂变的影响。方法：药物复方降脂宁主要由泽泻、姜黄、莱菔子组成。将48只小鼠随机分为正常组、模型对照组、阳性对照组、药物低剂量组、药物中剂量组和药物高剂量组。对各组小鼠进行造模和给药,7d后检测小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量，并对肝脏进行病理学检测，观察脂变情况。结果：复方降脂宁能够降低实验性高脂血症小鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量，其中高剂量组TG含量的降低具有显著性差异(P<0.05)；能够减轻肝脏脂变的程度，减少脂变肝细胞数目，缩小肝脂变面积。结论：复方降脂宁能降低实验性高脂血症小鼠血清的脂质含量，并有效抑制其肝脏脂变，对脂质代谢紊乱有明显的调节作用。
关键词：复方降脂宁；高脂血症；脂质代谢；肝脏脂变
中图分类号：R589.2文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0018-03
中药复方降脂宁主要由泽泻、姜黄、莱菔子组成。本实验通过研究复方降脂宁对实验性高脂血症小鼠血脂和肝脏脂变的影响，从而对复方降脂宁调节脂质代谢作用进行初步评价。
1 实验材料
1.1 动物
健康昆明种封闭群小鼠48只，体重25±5.1g，雌雄各半，由乐山长征制药厂提供。
1.2 药物
阳性药物：洛伐他汀，规格20mg，由昆明四创药业有限公司提供（批号20061101）。按照人体用量的10倍计算，取洛伐他汀16.66mg，研磨粉末，用100mL蒸馏水溶解，冷藏备用。
复方降脂宁：提取泽泻、姜黄、莱菔子的有效成分，依处方配制成复方降脂宁溶液。
1.3 主要试剂
甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒：北京中生生化工程高技术公司产品；胆固醇：上海伯奥生物科技有限公司产品（规格25g，批号070108）；去氧胆酸钠：上海伯奥生物科技有限公司进口分装(规格10g，批号040923)；丙硫氧嘧啶：上海复星朝晖药业有限公司产品（规格50mg，批号060904）；猪油：300g，市售。
1.4 主要仪器
722型光栅分光光度仪：上海精密科学仪器有限公司产品；
30RF型高速离心机：日本日立公司产品；
7600全自动生化分析仪：日本日立公司产品。
2 实验方法
2.1 造模所用脂肪乳的配制
本实验造模所用脂肪乳采用以下方法配制［1］：
取2.4g丙硫氧嘧啶于乳钵中研细，备用。取48g猪油于40℃水浴加热融化，置乳钵中，加入24g胆固醇、2.4g丙硫氧嘧啶，充分搅拌、溶解，再缓缓加入10％去氧胆酸钠溶液48mL，不断搅拌，然后加12mL吐温-80，研磨乳化均匀，最后加蒸馏水至240mL，装入密闭容器中，冷藏。
2.2 动物分组及造模用药
健康小鼠48只，雌雄各半，随机分为6组：正常组、模型对照组、阳性对照组、药物低剂量组、药物中剂量组及药物高剂量组。每组8只。
小鼠正常饲养7d后每日下午，正常组灌胃蒸馏水0.5mL/只，其它组小鼠灌胃脂肪乳0.5mL/只；每日上午，正常组和模型对照组灌胃蒸馏水0.5mL/只，阳性对照组灌胃洛伐他汀0.5mL/只，药物低、中、高剂量组分别灌胃低、中、高剂量复方降脂宁溶液0.5mL/只。连续7d。
2.3 标本的采集、制备
各组动物最后一次灌胃后，禁食12h，不禁水。
2.3.1 血清的制备
眼球取血，采抗凝血液于洁净干燥试管内，上机分离血清（3000r/min，10min），用于血清生化测定。
2.3.2 病理标本的制作
将小鼠处死，解剖，取肝脏用10%福尔马林溶液固定后，常规石蜡包埋、切片，苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察。
3 检测指标
3.1 血清生化测定
胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），按检测试剂盒说明方法，取血清于全自动生化分析仪上检测。
3.2 肝组织病理学检查
肝组织石蜡切片HE染色，光学显微镜下观察肝脏组织形态、脂肪变程度及肝细胞变性的情况。
4 统计方法
计量资料将各组数据进行方差分析后，采用t检验，检验方法采用SPSS13.0统计软件计算。
5 实验结果
5.1 对小鼠血液生化指标变化的观察
实验过程中阳性对照组和药物高剂量组小鼠各死亡1只。
注：与正常组相比，※表示P<0.05；与模型对照组相比，△表示P<0.05。
与正常组比较，模型对照组血清TC、TG含量升高，其中TC含量变化具有显著性差异（P<0.05）;与模型对照组相比，阳性对照组血清TC、TG含量降低，但无显著性差异（P>0.05）;三个药物组血清TC、TG含量有不同程度的降低，与阳性对照组相比均无显著性差异（P>0.05），药物高剂量组TG与模型对照组比较具有显著性差异（P<0.05）;三个药物组与模型对照组比较，伴随着剂量的增加血清TC、TG含量的降低幅度逐渐增大，但无显著性差异（P>0.05）。
模型对照组血清HDL-C、LDL-C含量高于正常组，且均具有显著性差异（P<0.05）;阳性对照组与三个药物组相比HDL-C、LDL-C含量无显著性差异（P>0.05）;阳性对照组和三个药物组血清HDL-C、LDL-C含量与模型对照组比较有不同程度的降低，但均无显著性差异（P>0.05）。三个药物组与模型对照组比较，伴随着剂量的增加血清HDL-C、LDL-C含量的降低幅度逐渐增大。
注：与正常组相比，※表示P<0.05。
5.2 对小鼠肝脏组织病理观察
正常组：小鼠肝组织无异常，肝窦清晰可见，肝索排列整齐，细胞边界清晰，胞质丰富(见图1)。
模型对照组：小鼠肝组织出现弥漫性脂变，肝索排列紊乱，肝细胞表现为大小不等的空泡状，严重者相互融合，将细胞核挤向一边，属于典型肝细胞脂肪变性(见图2)。
阳性对照组：小鼠肝脂变程度一定程度减轻，部分肝细胞正常，近下缘处可见肝细胞脂肪变性，但与模型组相比，脂变肝细胞数目减少，脂变面积缩小(见图3)。
药物低剂组：小鼠肝脂变程度有所减轻，但从总体来看，其减轻程度不如降脂宁其它剂量组(见图4)。
药物中剂组：小鼠肝脂变程度一定程度减轻，肝细胞内少见空泡，脂变肝细胞数目减少，脂变面积缩小(见图5)。
药物高剂组：小鼠肝脂变程度明显减轻，正常细胞数量占多数，脂变肝细胞数目减少，脂变面积缩小(见图6)。
实验结果表明，降脂宁能有效抑制小鼠肝脏的弥漫性脂变，减少脂变肝细胞的数目、缩小脂变面积。
6 讨论
本研究表明，复方降脂宁能够抑制血清脂质的升高，从而改善脂质代谢异常，促进血脂代谢恢复正常；能够抑制实验性高脂血症小鼠的肝脏脂变，减少血脂升高对肝脏造成的损害。
实验中发现模型对照组血清HDL-C含量高于正常组，这可能是在造模情况下，随着血中胆固醇的增多，机体反馈性地引起脂蛋白增加以清除胆固醇，本实验周期仅为7d，而脂质代谢需要一定的时间，在血中胆固醇含量较高的情况下，脂蛋白在短时间内难以下降。这一点在进行芹菜提取物对喂饲高脂饲料大鼠血脂的影响研究时也有所发现［2］；而阳性对照组和三个药物组血清HDL-C含量与模型对照组比较有不同程度的降低，可能是各组药物促进高密度脂蛋白将血中胆固醇运送到肝脏代谢，从而造成血中总胆固醇含量下降，最终引起HDL-C的下降。
本研究说明复方降脂宁是一种很有前景的调节脂质代谢药物，对预防和治疗由脂质代谢紊乱导致的心血管、脂肪肝等疾病有积极的意义。
参考文献：
［1］ 万丽，张加雄，陈芳，等.用脂肪乳剂建立小鼠高脂血症模型［J］.成都中医药大学学报，2004，27(3)：36.
［2］ 夏薇，隋焕平，邱隽，等.芹菜提取物对喂饲高酯饲料大鼠血脂的影响［J］.中国公众卫生，2001，（4）：337-338.
（责任编辑：姜付平）
Regulation of the Compound Jiangzhining on Lipid Metabolism
Zhang Zhanping，Yan Zhiyong，Chen Chang，Qin Jinzhi，Peng Jia
(Pharmacy School of Southwest Jiaotong University，E’meishan， Sichuan614202，China)
Abstract：
Aims：To investigate the effects of Compound Jiangzhining on serum lipids and hepatic steatosis in experimental hyperlipidemic mice. Methods：Compound Jiangzhining was consisted of Alismatis，Curcuma and Semen Raphani. 48 mice were randomly divided into normal group，the control group，the positive control group，low-dose drug group，middle-dose drug group and high-dose drug group. All the mice were established model and administrated. After 7 days，some index of blood samples from mice were tested，including TC，TG，HDL-C，LDL-C levels，and observed hepatic steaosis.Results：Compound Jiangzhining could reduce serum TC，TG，HDL-C，LDL-C of experimental hyperlipidemic mice，the TG significantly increased (P<0.05). Compound Jiangzhining also could improve hepatic steatosis existing，reduce the number and the area of fatty liver cells.Conclusion：Compound Jiangzhining could reduce serum TC，TG，HDL-C，LDL-C，improve hepatic steatosis existing and regulate the disorder of lipid metabolism in experimental hyperlipidemia mice.
Key words：
The Compound Jiangzhining；Hyperlipemia；Lipid metabolism；Hepatic steatosis.
关键词：复方降脂宁；高脂血症；脂质代谢；肝脏脂变
中图分类号：R589.2文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0018-03
中药复方降脂宁主要由泽泻、姜黄、莱菔子组成。本实验通过研究复方降脂宁对实验性高脂血症小鼠血脂和肝脏脂变的影响，从而对复方降脂宁调节脂质代谢作用进行初步评价。
1 实验材料
1.1 动物
健康昆明种封闭群小鼠48只，体重25±5.1g，雌雄各半，由乐山长征制药厂提供。
1.2 药物
阳性药物：洛伐他汀，规格20mg，由昆明四创药业有限公司提供（批号20061101）。按照人体用量的10倍计算，取洛伐他汀16.66mg，研磨粉末，用100mL蒸馏水溶解，冷藏备用。
复方降脂宁：提取泽泻、姜黄、莱菔子的有效成分，依处方配制成复方降脂宁溶液。
1.3 主要试剂
甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒：北京中生生化工程高技术公司产品；胆固醇：上海伯奥生物科技有限公司产品（规格25g，批号070108）；去氧胆酸钠：上海伯奥生物科技有限公司进口分装(规格10g，批号040923)；丙硫氧嘧啶：上海复星朝晖药业有限公司产品（规格50mg，批号060904）；猪油：300g，市售。
1.4 主要仪器
722型光栅分光光度仪：上海精密科学仪器有限公司产品；
30RF型高速离心机：日本日立公司产品；
7600全自动生化分析仪：日本日立公司产品。
2 实验方法
2.1 造模所用脂肪乳的配制
本实验造模所用脂肪乳采用以下方法配制［1］：
取2.4g丙硫氧嘧啶于乳钵中研细，备用。取48g猪油于40℃水浴加热融化，置乳钵中，加入24g胆固醇、2.4g丙硫氧嘧啶，充分搅拌、溶解，再缓缓加入10％去氧胆酸钠溶液48mL，不断搅拌，然后加12mL吐温-80，研磨乳化均匀，最后加蒸馏水至240mL，装入密闭容器中，冷藏。
2.2 动物分组及造模用药
健康小鼠48只，雌雄各半，随机分为6组：正常组、模型对照组、阳性对照组、药物低剂量组、药物中剂量组及药物高剂量组。每组8只。
小鼠正常饲养7d后每日下午，正常组灌胃蒸馏水0.5mL/只，其它组小鼠灌胃脂肪乳0.5mL/只；每日上午，正常组和模型对照组灌胃蒸馏水0.5mL/只，阳性对照组灌胃洛伐他汀0.5mL/只，药物低、中、高剂量组分别灌胃低、中、高剂量复方降脂宁溶液0.5mL/只。连续7d。
2.3 标本的采集、制备
各组动物最后一次灌胃后，禁食12h，不禁水。
2.3.1 血清的制备
眼球取血，采抗凝血液于洁净干燥试管内，上机分离血清（3000r/min，10min），用于血清生化测定。
2.3.2 病理标本的制作
将小鼠处死，解剖，取肝脏用10%福尔马林溶液固定后，常规石蜡包埋、切片，苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察。
3 检测指标
3.1 血清生化测定
胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），按检测试剂盒说明方法，取血清于全自动生化分析仪上检测。
3.2 肝组织病理学检查
肝组织石蜡切片HE染色，光学显微镜下观察肝脏组织形态、脂肪变程度及肝细胞变性的情况。
4 统计方法
计量资料将各组数据进行方差分析后，采用t检验，检验方法采用SPSS13.0统计软件计算。
5 实验结果
5.1 对小鼠血液生化指标变化的观察
实验过程中阳性对照组和药物高剂量组小鼠各死亡1只。
注：与正常组相比，※表示P<0.05；与模型对照组相比，△表示P<0.05。
与正常组比较，模型对照组血清TC、TG含量升高，其中TC含量变化具有显著性差异（P<0.05）;与模型对照组相比，阳性对照组血清TC、TG含量降低，但无显著性差异（P>0.05）;三个药物组血清TC、TG含量有不同程度的降低，与阳性对照组相比均无显著性差异（P>0.05），药物高剂量组TG与模型对照组比较具有显著性差异（P<0.05）;三个药物组与模型对照组比较，伴随着剂量的增加血清TC、TG含量的降低幅度逐渐增大，但无显著性差异（P>0.05）。
模型对照组血清HDL-C、LDL-C含量高于正常组，且均具有显著性差异（P<0.05）;阳性对照组与三个药物组相比HDL-C、LDL-C含量无显著性差异（P>0.05）;阳性对照组和三个药物组血清HDL-C、LDL-C含量与模型对照组比较有不同程度的降低，但均无显著性差异（P>0.05）。三个药物组与模型对照组比较，伴随着剂量的增加血清HDL-C、LDL-C含量的降低幅度逐渐增大。
注：与正常组相比，※表示P<0.05。
5.2 对小鼠肝脏组织病理观察
正常组：小鼠肝组织无异常，肝窦清晰可见，肝索排列整齐，细胞边界清晰，胞质丰富(见图1)。
模型对照组：小鼠肝组织出现弥漫性脂变，肝索排列紊乱，肝细胞表现为大小不等的空泡状，严重者相互融合，将细胞核挤向一边，属于典型肝细胞脂肪变性(见图2)。
阳性对照组：小鼠肝脂变程度一定程度减轻，部分肝细胞正常，近下缘处可见肝细胞脂肪变性，但与模型组相比，脂变肝细胞数目减少，脂变面积缩小(见图3)。
药物低剂组：小鼠肝脂变程度有所减轻，但从总体来看，其减轻程度不如降脂宁其它剂量组(见图4)。
药物中剂组：小鼠肝脂变程度一定程度减轻，肝细胞内少见空泡，脂变肝细胞数目减少，脂变面积缩小(见图5)。
药物高剂组：小鼠肝脂变程度明显减轻，正常细胞数量占多数，脂变肝细胞数目减少，脂变面积缩小(见图6)。
实验结果表明，降脂宁能有效抑制小鼠肝脏的弥漫性脂变，减少脂变肝细胞的数目、缩小脂变面积。
6 讨论
本研究表明，复方降脂宁能够抑制血清脂质的升高，从而改善脂质代谢异常，促进血脂代谢恢复正常；能够抑制实验性高脂血症小鼠的肝脏脂变，减少血脂升高对肝脏造成的损害。
实验中发现模型对照组血清HDL-C含量高于正常组，这可能是在造模情况下，随着血中胆固醇的增多，机体反馈性地引起脂蛋白增加以清除胆固醇，本实验周期仅为7d，而脂质代谢需要一定的时间，在血中胆固醇含量较高的情况下，脂蛋白在短时间内难以下降。这一点在进行芹菜提取物对喂饲高脂饲料大鼠血脂的影响研究时也有所发现［2］；而阳性对照组和三个药物组血清HDL-C含量与模型对照组比较有不同程度的降低，可能是各组药物促进高密度脂蛋白将血中胆固醇运送到肝脏代谢，从而造成血中总胆固醇含量下降，最终引起HDL-C的下降。
本研究说明复方降脂宁是一种很有前景的调节脂质代谢药物，对预防和治疗由脂质代谢紊乱导致的心血管、脂肪肝等疾病有积极的意义。
参考文献：
［1］ 万丽，张加雄，陈芳，等.用脂肪乳剂建立小鼠高脂血症模型［J］.成都中医药大学学报，2004，27(3)：36.
［2］ 夏薇，隋焕平，邱隽，等.芹菜提取物对喂饲高酯饲料大鼠血脂的影响［J］.中国公众卫生，2001，（4）：337-338.
（责任编辑：姜付平）
Regulation of the Compound Jiangzhining on Lipid Metabolism
Zhang Zhanping，Yan Zhiyong，Chen Chang，Qin Jinzhi，Peng Jia
(Pharmacy School of Southwest Jiaotong University，E’meishan， Sichuan614202，China)
Abstract：
Aims：To investigate the effects of Compound Jiangzhining on serum lipids and hepatic steatosis in experimental hyperlipidemic mice. Methods：Compound Jiangzhining was consisted of Alismatis，Curcuma and Semen Raphani. 48 mice were randomly divided into normal group，the control group，the positive control group，low-dose drug group，middle-dose drug group and high-dose drug group. All the mice were established model and administrated. After 7 days，some index of blood samples from mice were tested，including TC，TG，HDL-C，LDL-C levels，and observed hepatic steaosis.Results：Compound Jiangzhining could reduce serum TC，TG，HDL-C，LDL-C of experimental hyperlipidemic mice，the TG significantly increased (P<0.05). Compound Jiangzhining also could improve hepatic steatosis existing，reduce the number and the area of fatty liver cells.Conclusion：Compound Jiangzhining could reduce serum TC，TG，HDL-C，LDL-C，improve hepatic steatosis existing and regulate the disorder of lipid metabolism in experimental hyperlipidemia mice.
Key words：
The Compound Jiangzhining；Hyperlipemia；Lipid metabolism；Hepatic steatosis.