【摘 要】
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目的 研制一种可同时预防棘球蚴病与狂犬病的重组活载体疫苗.方法 利用反向遗传技术,将细粒棘球蚴Eg95基因ORF区插入狂犬病病毒弱毒SAD株基因组的假基因区,得到全长感染性克
【机 构】
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山东大学齐鲁医学院公共卫生学院微生物检验学系,济南 250012;军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所,长春 130062
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目的 研制一种可同时预防棘球蚴病与狂犬病的重组活载体疫苗.方法 利用反向遗传技术,将细粒棘球蚴Eg95基因ORF区插入狂犬病病毒弱毒SAD株基因组的假基因区,得到全长感染性克隆,与辅助质粒共转染BHK-21细胞,拯救获得重组狂犬病病毒SAD-EG95株.结果 重组病毒SAD-EG95株经RT-PCR与免疫荧光鉴定,表明重组病毒基因组中包含细粒棘球蚴Eg95基因,且能表达EG95蛋白.该重组病毒能在BHK-21和NA细胞中复制,病毒生长曲线与亲本株SAD差异较小,且传代稳定性良好,能在小鼠模型中诱导产生狂犬病病毒和细粒棘球蚴特异性保护抗体.结论 成功构建表达细粒棘球蚴EG95蛋白的重组狂犬病病毒,为进一步研制预防狂犬病和细粒棘球蚴的二联疫苗奠定了基础.
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