探讨骨髓间质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSC）和脂肪间质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells, ADSC）混合培养后的成骨分化能力。
方法以贴壁法和酶消化法获得BMSC和ADSC，用流式细胞术鉴定细胞表型；对两种细胞进行成脂肪、成软骨、成骨诱导，分别以油红"O"染色、甲苯胺蓝染色、茜素红染色进行鉴定；碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）、茜素红染色鉴定成骨分化。取第3代BMSC和ADSC细胞加入成骨诱导液，根据不同处理方法分为四组：BMSC未诱导组、BMSC成骨诱导组、ADSC成骨诱导组、BMSC+ADSC成骨诱导组。成骨诱导第1、3、5、7、9、11天检测ALP活性，第7、14、21、28天检测钙离子吸光度，第14天采用RT-PCR和Western Blot检测骨钙素（Osteocalcin，OCN）、Runx2蛋白的表达。将BMSC、ADSC或BMSC+ADSC细胞植入羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸（Hydroxylapatite/Chitosan/Poly L-latic acid，HA/CS/PLLA）支架材料，植入大鼠下肢骨缺损模型，术后8周取材检测复合材料的新骨形成面积。
结果ADSC和BMSC两种细胞在成脂、成软骨、成骨诱导后染色均为阳性。诱导第1、3天，各组细胞ALP活性增加不明显，第5天以后活性开始明显增强，其中BMSC+ADSC组高于其他三组。诱导第7天，各组细胞钙离子吸光度无明显变化，第14天开始逐渐增高，其中BMSC+ADSC成骨诱导组高于其他三组。诱导第14天，BMSC+ADSC成骨诱导组OCN和Runx2基因表达（分别为78.24±8.11, 1 180.13±121.16）和蛋白表达（分别为6.54±0.59，4.43±0.51）较其他三组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。材料植入体内8周后，BMSC+ADSC组有大量板状骨形成，支架材料基本降解完全，新骨形成面积为（497.75±7.44）μm2，明显大于其他三组，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论BMSC与ADSC两种细胞混合培养较单一细胞的体内和体外成骨能力增强。