TaqMan MGB Real-time RT——PCR检测西尼罗病毒方法的建立

• 作 者: 郑夔 周惠琼 柯昌文
• 机 构: 广东省疾病预防控制中心微生物检验所
• 出 处: 中国病原生物学杂志
• 发表日期: 2008年3期
• 关键词: 西尼罗病毒 TAQMAN MGB探针 REAL-TIME RT-PCR West Nile virus TaqMan MGB probe Real-time R
• 基金项目: 日本21世纪COE项目“人畜共患传染病控制研究开发”基金资助课题.

目的建立一种灵敏、特异、高效的西尼罗病毒（West Nilevirus，WNV）感染诊断和流行病学调查的实验室检测方法。方法用C6／36细胞培养WNV并用Vero细胞蚀斑法滴定病毒浓度；根据wNVC蛋白基因组保守序列，设计一套特异性引物和TaqManMGB探针，用细胞培养病毒液进行方法的条件优化；用不同病毒评价方法的特异性，用系列浓度病毒稀释液和染毒蚊子评价方法的灵敏性。结果建立的TaqManMGBReal-timeRT-PCR方法可检出低于0．01PFU的WNVRNA，并可检出只含3只染毒蚊的标本；用该