分泌高滴度重组人糖皮质激素β受体正义和反义cDNA逆转录病毒细胞系的建立

• 作 者: 朱敏 何庆南 周钢 张磊 C.I.Msangi 胡
• 机 构: 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心,中南大学湘雅二医院儿科及小儿肾病学实验室
• 出 处: 中南大学学报：医学版
• 发表日期: 2004年5期
• 关键词: 反义CDNA 逆转录病毒 β受体 糖皮质激素 分泌 细胞系 高滴度 细胞克隆 全长cDNA 质粒 human glucocorticoid receptor β
• 基金项目: 国家自然科学基金

目的:建立分泌重组人糖皮质激素β受体cDNA的逆转录病毒的细胞系.方法:脂质体介导含人糖皮质激素β受体正义和反义全长cDNA的重组逆病毒质粒分别转染包装细胞PA317,经G418筛选抗性克隆.结果:细胞培养上清液的RT-PCR联合序列分析表明G418抗性PA317细胞克隆能稳定合成并分泌相应的重组病毒颗粒;NIH3T3细胞测定的正、反义cDNA重组病毒滴度分别为2×105 CFU/ml和1.8×105 CFU/ml.结论:成功建立了能分别产生重组hGRβ正义和反义cDNA逆转录病毒的高