【摘 要】
：
为建立猪捷申病毒(PTV)的TaqMan实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,在PTV基因组序列保守区设计引物和TaqMan探针,构建重组质粒作为阳性标准品,通过优化反应条件,建立了检
【机 构】
：
广西兽医研究所 广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁530001;广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005
论文部分内容阅读
为建立猪捷申病毒(PTV)的TaqMan实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,在PTV基因组序列保守区设计引物和TaqMan探针,构建重组质粒作为阳性标准品,通过优化反应条件,建立了检测PTV的RT-qPCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验.结果表明,该方法仅对PTV出现特异性扩增反应,与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒等常见猪病毒均无交叉反应.该方法的标准曲线Ct值与4.6×108～4.6×102拷贝/μL的质粒浓度范围具有良好线性关系,标准曲线方程为Ct=-3.201 x logX+40.527,线性相关系数(R2)为0.996,检测下限为4.6 x 101拷贝/μL.对不同浓度的pMD18-PTV进行组内与组间重复检测,每个浓度重复试验的Ct值的变异系数均小于4.0％,具有良好的重现性.应用所建立的方法对235份临床猪腹泻样品进行检测,PTV阳性样品32份,样品阳性率为13.62％.本试验建立的RT-qPCR方法为PTV实验室检测及病毒研究分析提供了可靠的技术手段.
其他文献
1941年，美国洛杉矶。深夜，在一间宽敞的摄影棚内，一群人正在忙着拍摄一部电影。 “停！”刚开拍几分钟，年轻的导演就大喊起来，一边做动作一边对着摄影师大声说：“我要的是一个大仰角，大仰角，明白吗？” 又是大仰角！这个镜头已经反复拍摄了十几次，演员、录音师......所有的工作人员都已累得筋疲力尽。可是这位年轻的导演总是不满意，一次次地大声喊：“停！”一遍遍地向着摄影师大叫“大仰角！”
贺国平,1958年出生于武汉,毕业于湖北美术学院。现为中国工艺美术学会书画专业委员会理事,湖北省美术家协会会员,其作品曾参加全国及省市美术展览并获奖,在《中国水彩》《水
为了研究巨型艾美耳球虫顶膜抗原1(AMA1)的细胞定位及功能,制备了抗AMA1的单克隆抗体并进行了鉴定.首先,用大肠杆菌(DE3)表达了巨型艾美耳球虫AMA1蛋白,蛋白经纯化后免疫小鼠
我们生活的这片国土,究竟有多么美丽多么诱人?世界地质公园,给出了一个最强有力的回答。为了保护那些珍贵的地质遗迹和更好地普及地质科学知识,联合国世界教科文组织于2000年
市科学技术局、市财政局日前出台关于推进产业技术创新战略联盟建设的实施意见 ；到2015年，我市将组建产业技术创新战略联盟30个，加盟企业达到1000家。 产业技术创新战略联盟是市场经济条件下促进产学研合作的新型技术创新组织，是我市创新型城市建设的重要载体。联盟由企业、大学和科研机构等多个独立法人组成。企业应具有一定的技术成果转化和产业化条件，大学或科研机构在合作的技术领域具有国内或区域前沿水平。
为了解山东省猫细小病毒(FPV)、猫疱疹病毒1型(FHV-1)和猫杯状病毒(FCV)的流行情况,对来自5个不同地区的380份口鼻、粪便拭子进行三重PCR检测,同时对这3种病毒进行分离.结果
航卫照片、卫星照片和陆地摄影照片,真实地、集中地反映了较大范围内的岩土类型,地质结构、地貌、水文地质条件和物理地质现象,详细判释研究能给人一个宏观的总体认识。近年
为了解麋鹿的黏膜免疫屏障,采用甲苯胺蓝染色法研究初生麋鹿小肠各段肥大细胞的分布特征.结果显示,初生麋鹿十二指肠、空肠和回肠的肥大细胞形态多样,胞质中可见蓝紫色颗粒,
认识周皓先是从文字上。因为编稿,看到关于周皓入选全国“最美青工”的记者来稿,一篇接一篇,由此对这个青年有了文字中的感性认识,很赞赏他的爱岗、他的敬业、他的技能。走近
传统高中政治课堂教学在落实目标中更注重知识与技能目标,对过程与方法,情感、态度与价值观目标较为忽视,这更多是受制于传统应试教育观念的影响。随着新课改的不断深入,高中