【摘 要】
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目的 采用性状鉴别与DNA条形码联用的方法对市售海马药材鲍氏海马(Hippocampus barbouri)进行生药学研究,为其后续鉴定技术开发与应用奠定基础.方法 通过文献结合样品观察总
【机 构】
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浙江中医药大学药学院,杭州,310053;浙江中医药大学第一临床医学院,杭州,310006
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目的 采用性状鉴别与DNA条形码联用的方法对市售海马药材鲍氏海马(Hippocampus barbouri)进行生药学研究,为其后续鉴定技术开发与应用奠定基础.方法 通过文献结合样品观察总结鲍氏海马的典型性状鉴别特征;提取鲍氏海马样品基因组DNA,对COI、16S和ATP6基因序列进行扩增和测序,通过MEGA 7分析各序列,计算不同条形码在种内和种间遗传距离的差异,并构建系统进化树,分析不同条形码在鲍氏海马鉴定中的优劣.结果 鲍氏海马的典型鉴别特征包括鼻子有条纹,眼眶内有5条辐射状条纹和尾刺的长短间隔;COI、16S、ATP6序列长度分别为649～650、574和603 bp,不同序列的最大种内遗传距离分别为0.012、0.003和0.003,远小于鲍氏海马与其他海马品种间的最小遗传距离,存在显著的条形码间隔;基于COI、16S和ATP6条形码构建的NJ树结果均显示,鲍氏海马样品单独聚为一个分支,与其他正伪品海马能明显区分,与刺海马的亲缘关系最近,且COI与ATP6构建的NJ树结构更加稳定.结论 基于性状鉴别与DNA条形码联用的生药学研究可获得鲍氏海马的性状和分子鉴定特征,COI、16S和ATP6序列可用于鲍氏海马的后续分子鉴定技术,本实验为鲍氏海马的后续开发和保障海马的药材质量提供了新的技术手段.
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