【摘 要】
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将HIV-1 Tat（1-86aa）编码序列插入原核表达质粒pET28a中,转化E.coliBL21（DE3）,IPTG诱导Tat蛋白表达,并用Ni＋金属螯合层析介质纯化;把TAR DNA序列插入到含有T7启动子的载体pBluescr
【基金项目】
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上海市浦江人才计划项目（06PJ14026）
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将HIV-1 Tat（1-86aa）编码序列插入原核表达质粒pET28a中,转化E.coliBL21（DE3）,IPTG诱导Tat蛋白表达,并用Ni＋金属螯合层析介质纯化;把TAR DNA序列插入到含有T7启动子的载体pBluescript Ⅱ SK（＋）中,用T7 RNA多聚酶体外转录合成TAR RNA。用毛细管电泳观察Tat与TAR的结合活性,并用转录抑制活性化合物AP064检验对Tat-TAR结合的阻断作用。结果显示,制备的Tat和TAR能相互结合,并被AP064有效阻断,表明此模型可用于筛选抑制T
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