【摘 要】
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目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA的方法.方法采用柱层析纯化的方法抽提血清中HCVRNA.以5'端带有生物素的引物进行RT-PCR
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院临床检验中心
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目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA的方法.方法采用柱层析纯化的方法抽提血清中HCVRNA.以5'端带有生物素的引物进行RT-PCR Tth酶一步法扩增,通过固定于微孔板上的捕获探针与带有生物素的PCR扩增产物杂交后,利用标记有铕的链霉亲合素与生物素的特异性结合,将铕连接到待测核酸上,在特定波长的激发光激发下发出荧光,进行检测.结果铕标记检测法与酶标法的变异系数、敏感性、特异性分别为10.43%、100%,100%与16.25%,94%,100%
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