缺血预处理诱导的血清外泌体对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lipz7517
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目的 探讨缺血预处理(IPC)诱导的血清外泌体(Exo)对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法 成年雄性SD大鼠,体质量250~300 g。按照随机数字表法分为2组(n=4):IPC组,大鼠开胸结扎冠状动脉左前降支5min,放松5 min;3个循环;对照组(CON),大鼠开胸后仅穿线不结扎。预处理结束后利用ExoQuickTM试剂盒提取血清Exo,分别标记为Exo-IPC、Exo-CON。采用透射电镜观察Exo形态、Western blot法检测标志性蛋白,BCA法测定Exo浓度。另将30只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为5组(n=6):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、I/R+Exo-IPC组、I/R+Exo-CON组、溶剂对照组(I/R+PBS组)。除Sham组外,其余各组均给予冠状动脉左前降支结扎缺血30 min,再灌注120 min。I/R+Exo-IPC组、I/R+Exo-CON组、I/R+PBS组分别于缺血前15 min经静脉给予Exo-IPC、Exo-CON和PBS。再灌注120 min后取血,测定血清肌钙蛋白I(cTnI)水平,心脏标本进行氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,测量左心室(LV)、右心室(RV)、梗死区(IS)、缺血危险区(AAR)体积以及IS/ARR比值。结果 透射电镜下可见外泌体呈圆形囊泡,平均直径约30~100 nm;与Exo-CON比较,Exo-IPC中外泌体标志性的蛋白抗白细胞分化抗原63 (CD63)及热休克蛋白60 (HSP60)的相对表达量增高(P<0.05);Exo-IPC中Exo浓度较Exo-CON也显著增高(P<0.05)。与Sham组比较,其余各组IS体积、IS/AAR和cTnI水平均显著升高(P <0. 05);与I/R组比较,I/R+Exo-IPC组IS体积、IS/AAR和cTnI水平均降低(P <0. 05);相反,I/R+Exo-CON组、I/R+PBS组的IS体积、IS/AAR和cTnI水平,与I/R组比较差异无统计学意义。结论 IPC可引起大鼠血清Exo释放增加,这种IPC诱导的Exo可减轻受体大鼠心肌I/R损伤,从而发挥心肌保护作用。
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