【摘 要】
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目的 筛选结肠癌多药耐药相关基因,探讨结肠癌多药耐药的机制.方法 通过逐步递增氟尿嘧啶(5-FU)浓度孵育结肠癌Lovo细胞,建立耐药细胞株Lovo/5-FU.MTT法检测Lovo/5-FU细胞对5
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院外科 上海消化外科研究所 上海市胃肿瘤重点实验室
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目的 筛选结肠癌多药耐药相关基因,探讨结肠癌多药耐药的机制.方法 通过逐步递增氟尿嘧啶(5-FU)浓度孵育结肠癌Lovo细胞,建立耐药细胞株Lovo/5-FU.MTT法检测Lovo/5-FU细胞对5-FU和顺铂(CDDP)的敏感性.采用二维电泳-质谱联用技(2DE-MS)术比较Lovo和Lovo/5-FU两株细胞间差异表达蛋白,并采用Western blot法鉴定筛选蛋白.结果 与Lovo相比,Lovo/5-FU细胞对5-FU和CDDP的IC.值分别升高31倍和3倍(均P＜0.01).通过2DE-MS筛选得到,在耐药株中CAP-G和RhoGDI2表达上调,6-PGL、DCI、Prdx-6和Maspin表达下调.Western blot检测显示,Lovo/5-FU细胞中RhoGDI2和CAP-G较Lovo增高6.14倍和2.98倍(均P＜0.01),而Maspin则明显下降至Lovo中的5.2％(P＜0.01).结论 结肠癌耐药性的产生是多基因、多通路改变的结果.CAP-G、RhoGDI2、Maspin是潜在的结肠癌多药耐药相关基因.
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