【摘 要】
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目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因在E.coli重组表达,纯化重组SEC2(rSEC2)并进行生物学活性分析.方法 PCR获得正确编码SEC2的基因片断,构建表达质粒pET -28a-sec2在
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目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因在E.coli重组表达,纯化重组SEC2(rSEC2)并进行生物学活性分析.方法 PCR获得正确编码SEC2的基因片断,构建表达质粒pET -28a-sec2在E.coli BL21中表达.利用离子交换和分子筛色谱纯化rSEC2,四甲基偶氮唑盐(MTT)法对rSEC2和天然SEC2(nSEC2)生物学活性进行分析和比较.结果 可溶性rSEC2占菌体总蛋白质的40%,两步纯化后蛋白质纯度约达9 5%,rSEC2和nSEC2均具有显著的超抗原活性.结论 成功获得与nSEC2有着类似活性的高纯度rSEC2,为进一步研究该蛋白质的抗肿瘤机理奠定物质基础.
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