iNOS红色荧光蛋白报告基因载体的构建及其在细胞中的表达

• 作 者: 刘志锋 阚文宏 秦清和 邓鹏 王静珍 姜勇
• 机 构: 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室
• 出 处: 中国病理生理杂志
• 发表日期: 2003年12期
• 关键词: 一氧化氮合酶 红色荧光蛋白 基因 调节 基因 报告 Nitric-oxide synthase Red fluorescent protein Genes r

目的:构建iNOS启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,为研究细胞内iNOS的基因表达调控和相关的信号转导机制提供重要工具.方法:采用基因重组技术构建了含iNOS启动子区的红色荧光蛋白报告基因载体pDsRed1-1-iNOSp;用脂质体瞬时转染NIH3T3细胞,观察iNOS启动子对脂多糖(LPS)刺激的反应.结果:酶切和DNA测序证明所构建的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的;该表达载体在NIH3T3细胞静息状态下表达水平很低,经LPS刺激后,在荧光显微镜下可看到高亮度的红色荧光.结论:所构建的iNOS启动