沉默DOT1L基因对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响

• 作 者: 张玉娟 李华文 常国强 张洪菊 王建 蔺亚妮 周家喜 李庆华
• 机 构: 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院
• 出 处: 中国实验血液学杂志
• 发表日期: 2013年4期
• 关键词: DOT1L基因 急性单核细胞白血病 THP-1细胞 DOT1L gene acute monocytic leukemia THP-1 cell

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素（Dox）诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率;采用改良MTT法检测干扰DOT1L基因后对THP-1细胞增殖能力的影响;用细胞集落形成实验观察干扰后细胞集落形成的能力;用流式细胞术分析细胞周期的变化。结果表明：THP-1细胞干扰后DOT1L基因的表达显著降低;DOT1L基因的