【摘 要】
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目的构建含大鼠降钙素相关基因肽（CGRP）基因的慢病毒表达载体，为后续转染目的细胞并研究CGRP的功能奠定基础。方法通过基因工程技术将CGRP基因克隆到穿梭质粒中，构建Puc57-CGRP质
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81060014)
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目的构建含大鼠降钙素相关基因肽（CGRP）基因的慢病毒表达载体，为后续转染目的细胞并研究CGRP的功能奠定基础。方法通过基因工程技术将CGRP基因克隆到穿梭质粒中，构建Puc57-CGRP质粒，用双酶切法构建慢病毒表达载体（pLenO-DCE—CGRP），将该质粒载体与4种辅助包装质粒共转染293T细胞，转染的293T细胞继续培养48h后，收集其上清液，浓缩得到高滴度的慢病毒液，然后采用倍比稀释法和流式细胞术检测病毒滴度，并通过实时定量聚合酶链反应（PCR）检测293T细胞中CGRP基因的表达。结果成功构
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