人血红素氧合酶-1重组腺病毒的构建与鉴定

• 作 者: 吕金星 严春寅 侯建全 浦金贤 平季根 温端改
• 机 构: 苏州大学附属第一医院泌尿外科
• 出 处: 江苏医药
• 发表日期: 2006年11期
• 关键词: 血红素氧合酶-1 腺病毒载体 Heme oxygenase-1 Adenoviral vector

目的构建人血红素氧合酶-1（hHO-1）重组腺病毒，用以对供体器官的预处理。方法将人hHO-1cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒pSGCMV，得到重组质粒pSGCMV-hHO-1。采用位点特异性重组系统（Cre／Loxp）将pSGCMV-hHO-1与腺病毒骨架载体pBHGloxP△E3通过lipofecta mine2000共转染至293细胞，生成带有hHO-1基因的重组腺病毒载体Ad-hHO-1。重组腺病毒质粒在293细胞中扩增，CsCl梯度离心纯化。结果经酶切鉴定和测序证实载体构建的正确性，病毒滴度为2．0