虎奶菇Mn-SOD提取、鉴定及基因的克隆

• 作 者: 杨加亮 田云恒 马爱民
• 机 构: 华中农业大学食品科学技术学院
• 出 处: 食品工业科技
• 发表日期: 2020年15期
• 关键词: 虎奶菇 锰超氧化物歧化酶 酶活 同源克隆 融合引物与巢式PCR Pleurotus tuber-regiummanganese superoxide dismu
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31772375)

以虎奶菇菌丝为材料,提取、鉴定了虎奶菇锰超氧化物歧化酶,克隆虎奶菇锰超氧化物歧化酶基因。用液氮研磨、超声、硫酸铵沉淀和透析等方法提取虎奶菇Mn-SOD;WST-8法测定虎奶菇Mn-SOD酶活力;H2O2鉴定虎奶菇SOD的类型;用同源克隆、cDNA末端快速扩增技术和融合引物与巢式PCR等方法从虎奶菇中克隆锰超氧化物歧化酶基因。结果表明,虎奶菇Mn-SOD酶活力为1.66个酶活力单位。酶经过H2O2处理后仍然有活性,与未处理无明显差异,表明虎奶菇中SOD主要是Mn-SOD。克隆获得了虎奶菇锰超氧化物歧化酶基因