乙酰肝素酶系列表达载体的构建

• 作 者: 瞿小婷 赵华军 奚涛 侯永泰
• 机 构: 中国药科大学生物技术中心,中国科学院上海生命科学研究院药物研究所
• 出 处: 药物生物技术
• 发表日期: 2004年1期
• 关键词: 乙酰肝素酶 肿瘤转移 基因重组 Heparanase Cancer metasrasis DNA recombination

构建了人乙酰肝素酶基因系列真核表达载体,并在NIH3T3细胞中表达,以研究乙酰肝素酶的结构与功能的关系.采用PCR及Gene SOE的方法从人乙酰肝素酶cDNA中扩增得到hpaFL(Met1-Ile543),hpa109(Met1-Glu109)及hpasp50(pro,Met1-Ala35+Lys158-Ile543),然后插入真核表达载体pcDNA 3.1中.采用脂质体介导法将其转染NIH3T3细胞,48h后RT-PCR检测转染细胞中外源乙酰肝素酶基因的转录.结果:酶切鉴定、测序结果以及RT-PCR分