鸭甲肝病毒1型和3型HRM检测方法的建立

• 作 者: 董嘉文 李林林 张俊勤 黄允真 孙敏华
• 机 构: 广东省农业科学院动物卫生研究所,岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
• 出 处: 广东畜牧兽医科技
• 发表日期: 2021年3期
• 关键词: 鸭甲肝病毒1型 鸭甲肝病毒3型 HRM
• 基金项目: 科技创新战略专项资金(高水平农科院建设)(202110TD,R2020PY⁃JC001,R2020PY⁃JX014,R2020QD⁃049,R2018QD⁃093),江门市科技计划项目(DZX20192520301,2020030103310009038),梅州市科技计划项目(2020A0104004)。

本研究根据鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)和3型(DHAV-3)的5′UTR基因的保守区域,设计了1对特异性的引物,扩增目的片段大小约为199 bp。通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的鸭甲肝病毒1型和鸭甲肝病毒3型的鉴别检测方法。特异性试验结果表明,该方法能特异性地检测出DHAV-1和DHAV-3,检测其它常见鸭源病毒不能形成特异性的熔解峰;敏感性和重复性试验表明,对p-DHAV-1和p-DHAV-3阳性质粒的最低检测限分别为220 copies和28 copies,对不同批次的样