【摘 要】
：
目的构建含有GⅡ.21型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)衣壳蛋白VP1基因的重组质粒,通过PichiaPink毕赤酵母表达VP1蛋白,并鉴定纯化产物。方法合成NoV GⅡ.21 VP1蛋白基因
论文部分内容阅读
目的构建含有GⅡ.21型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)衣壳蛋白VP1基因的重组质粒,通过PichiaPink毕赤酵母表达VP1蛋白,并鉴定纯化产物。方法合成NoV GⅡ.21 VP1蛋白基因序列,将其连接至pPink-HC载体,构建重组质粒pPink-HC-GⅡ.21-VP1;经测序鉴定后,电转化毕赤酵母PichiaPink,甲醇诱导目的蛋白表达;采用AKTA pure M150型纯化仪纯化目的蛋白,Western blot法分析其抗原性,SEC-HPLC法检测纯化蛋白出峰时间。结果经测序鉴定,重组质粒pPink-HC-GⅡ.21-VP1构建正确;纯化的目的蛋白VP1纯度在95%以上,能与抗NoV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)抗体发生反应;测定目的蛋白出峰时间为16. 923 min,与NoV VLP理论出峰时间一致。结论成功在毕赤酵母高表达了GⅡ.21衣壳蛋白VP1,并制备了高纯度及良好抗原性的目的蛋白,为多价重组NoV疫苗的研发及规模化生产奠定了基础。
其他文献
通过对"三顾茅庐"案例的充分剖析,归纳出高校毕业生应对面试要锻炼"口才"和"应变能力",讲求外部形象包装,保持自信心和良好的精神面貌。总结诸葛亮的"面试"智慧对当前高校毕
<正>目的:通过配戴放松优势眼调节的眼镜来观察小儿屈光参差性弱视的治疗效果。方法:选取对我院小儿眼科自2014年2月起3-6岁儿童患者18例,均为一只眼视力正常,而另一只眼为的
随着我国国力的日益提高,中国已越来越成为国际社会的关注热点。外媒是怎么看我们的,"中国形象"如何,不仅成为人们热议的话题,也成为学者研究的课题。就此,本刊对上海外国语
自1975年,Dougherty开创了光动力疗法(PDT)以来,在检测和治疗肿瘤方面光动力疗法越来越受到科学家们的重视,成为科研领域的一大热点。 光动力疗法是应用了卟啉化合物如下
目的:观察参附注射液穴位注射治疗慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)的临床疗效。方法:将86例CHF患者随机分为2组各43例,2组均应用西医常规治疗,对照组加用参附注射液
有端横梁约束的简支单向组合梁-板体系在横向荷载作用下,由于剪力连接件的约束,翼缘板中存在剪力滞后现象.结构体系中,端横梁对剪力滞后程度有很大影响.本文采用有限元方法,
通过苏州城市环境地球化学调查工作的实施,对城市土壤环境地球化学研究的工作方法进行了初步研究.结果显示,苏州城市土壤的主要污染区域分布于东南居民生活区、西部工业区、
乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,近年来我国乳腺癌发病率呈明显上升趋势。实践证明,能有效提高乳腺癌生存率和降低绝对死亡率的决定因素不完全在于治疗手段,而应是早期发
近年来,随着人们对珠心算学习与珠心算教育研究的不断深入,人们对珠心算的本质与功能有了更深的理解,深深体会到珠算文化不仅不应被拋弃,反而应赋予更多的时代精神。
随着信息时代的来临,摄影开始更多的进入人们的视野中,摄影也开始普及与发展起来。其功能也开始呈现多样化,为中国影像发展注入了新的血液。近几年数字技术的发展,也为影像技