【摘 要】
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目的构建恶性疟原虫cDNA表达文库.方法 用Trizol试剂盒提取总RNA,以经修饰的SMART寡聚核苷酸引物-CDSⅢ引物直接用总R NA选择性地反转录成单链cDNA,再用长距PCR(LD)方法选择
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所药学研究室,军需大学基础部生化教研室,上海药物研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金，北京市自然科学基金
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目的构建恶性疟原虫cDNA表达文库.方法 用Trizol试剂盒提取总RNA,以经修饰的SMART寡聚核苷酸引物-CDSⅢ引物直接用总R NA选择性地反转录成单链cDNA,再用长距PCR(LD)方法选择性地扩增出双链cDNA,经蛋白酶K 消化和酶切后,用玻璃奶试剂盒回收200bp以上DNA片断,经与载体λTriplEX2连接和蛋白抽提物体外包装后,构建成cDNA文库并对文库进行了初步的鉴定.结果构建了高滴度,高重组率的恶性疟原虫cDNA表达文库.结论所构建的疟原虫cDNA文库适合进一步筛选抗疟原虫药物结合蛋
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