应用共转化技术在哺乳动物细胞中表达乙型肝炎病毒表面抗原

• 作 者: 阮力 任贵方 阮薇琴 朱纯 朱既明
• 机 构: 中国医学科学院病毒学研究所,中国医学科学院病毒学研究所,中国医学科学院病毒学研究所,中国医学科学院病毒学研究所,中国医学科学院病毒学研究所 北京,北京,北京,北京,北京
• 出 处: 中国医学科学院学报
• 发表日期: 1983年05期
• 关键词: 胞分泌 单拷贝 DNA 亚系 重组质粒 细胞克隆 乙肝病毒 拷贝 克隆化 首尾相连

用共转化技术分别将两种亚型的单拷贝HBV-DNA重组质粒与HSV-tk基因一起导入Ltk细胞获得成功。6系克隆化的tk~+细胞分泌HBsAg。分泌量较高的pA-3及PC-3两系细胞分泌物为特异性HBsAg,并含有约22nm大小的颗粒性HBsAg。初次细胞克隆HBsAg表达不稳定,再次克隆获得PC-3-1亚系传代160天仍表达HBsAg,说明再次克隆是选择HBsAg表达较稳定的细胞系的必要手段。单拷贝HBV-DNA转化成功,似说明首尾相连的双拷贝HBV-DNA并非必需。

Using the co-transformation technology, the two copies of the single copy HBV-DNA recombinant plasmid and HSV-tk gene were introduced into Ltk cells successfully. 6 cloned tk ~ + cells secrete HBsAg. Secretion of higher secretion of pA-3 and PC-3 two-cell secretions of specific HBsAg, and contains about 22nm size of particulate HBsAg. HBsAg expression in primary cell clone was unstable. Once cloned again, PC-3-1 subline was still expressing HBsAg for 160 days, indicating that re-cloning is a necessary method to select a more stable cell line expressing HBsAg. A single copy of HBV-DNA was successfully transformed, suggesting that double-stranded HBV-DNA is not necessary.