分析口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma ,OSCC)组织特征长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)表达谱,并探讨lncRNA结肠癌相关转录子2 (colon cancer associated transcript 2,CCAT2)在OSCC中的表达及临床意义。
方法采用高通量lncRNA芯片检测3例OSCC患者的癌组织及癌旁正常组织lncRNA表达水平,分析OSCC组织特征性lncRNA表达谱,进一步通过实时定量PCR (real-time quantitative PCR, RT-qPCR)检测86例OSCC及对应的癌旁组织中CCAT2的表达,并分析其与临床病理特征关系。设计合成CCAT2的靶向小干扰RNA (CCAT2-siRNA),脂质体转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞。实验分为阴性对照组和CCAT2-siRNA转染组(实验组),利用CCK-8实验检测CCAT2干预对Tca8113细胞增殖能力的影响。
结果OSCC患者癌组织与癌旁对照样本间差异表达的lncRNA共1 685个,其中936个表达上调,749个表达下调,差异表达倍数≥10的lncRNA共23个。RT-qPCR验证结果显示,与癌旁组织相比,lncRNA CCAT2在OSCC组织中高表达(平均上调5.7倍;P<0.01)。临床病理相关分析显示,CCAT2表达水平还与OSCC的细胞分化程度及病理分期相关。低分化OSCC组织中CCAT2表达水平明显高于中、高分化OSCC组织(P= 0.015);TNM分期Ⅲ+Ⅳ期OSCC组织的CCAT2表达水平明显高于Ⅰ+Ⅱ期标本(P=0.022)。CCK-8实验结果显示,下调舌鳞状细胞癌Tca8113细胞CCAT2表达可明显抑制细胞增殖,转染48、72 h实验组A值较对照组显著降低(P<0.01)。
结论多种lncRNA在OSCC患者肿瘤组织中呈异常表达,其中CCAT2在OSCC中的表达上调可能与OSCC的发生发展有关。