【摘 要】
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背景神经营养因子的缺乏与青光眼的视神经损害密切相关.外源性神经营养因子的补充具有短暂的保护作用.腺相关病毒(AAV)介导的神经营养因子可在眼内长期表达,但是否对青光眼动
【机 构】
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汕头大学·香港中文大学联合汕头国际眼科中心
【基金项目】
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汕头市科技计划;国家自然科学基金面上项目
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背景神经营养因子的缺乏与青光眼的视神经损害密切相关.外源性神经营养因子的补充具有短暂的保护作用.腺相关病毒(AAV)介导的神经营养因子可在眼内长期表达,但是否对青光眼动物的视神经具有持久的保护作用有待研究.目的评估AAV介导的脑源性神经营养因子(BDNF)基因在DBA/2J小鼠眼内的表达及其对视网膜神经节细胞(RGCs)的保护作用.方法健康清洁级DBA/2J小鼠10只从4月龄起,每月使用Tonolab眼压计测量眼压.6月龄时左眼玻璃体腔内注射AAV介导的BDNF和绿色荧光蛋白(GFP)基因(AAV-BDNF-GFP)1μl,右眼注射等量的生理盐水作为对照.注射后3个月心脏灌流后取出视网膜,荧光显微镜下观察GFP在视网膜中的表达,免疫组织化学法计算存活的RGCs数目并进行比较.结果DBA/2J小鼠4月龄时AAV-BDNF-GFP眼眼压平均为11.90 mmHg,对照眼眼压为11.40 mmHg.实验眼与对照眼眼压5月龄时均开始升高,8月龄时达到高峰.从4月龄到9月龄,实验组和对照组眼压比较差异无统计学意义(t=-1.78～0.61,P=0.11-0.90).玻璃体腔注射AAV.BDNF-GFP 3月龄后视网膜可以观察到GFP阳性细胞,转染率为46.33%±8.08%.AAV-BDNF-GFP组实验眼的平均RGCs的密度为(3168.13±1319.33)mm2,对照眼为(2024.81±796.38)mm2,差异有统计学意义(t=2.75,P=0.02).结论 AAV介导的BDNF对DBA/2J小鼠RGCs有保护作用.
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