【摘 要】
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目的 探讨miR - 203靶向抑制survivin对人胶质瘤细胞株U251生长和增殖的影响.方法 利用生物信息学预测miR -203靶基因；通过脂质体将miR - 203模拟物或表达质粒转染至U251细胞,
【机 构】
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南华大学教学医院广东省第二人民医院神经外科
【基金项目】
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广东省第二批科学事业费计划项目;
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目的 探讨miR - 203靶向抑制survivin对人胶质瘤细胞株U251生长和增殖的影响.方法 利用生物信息学预测miR -203靶基因；通过脂质体将miR - 203模拟物或表达质粒转染至U251细胞,使用Real - time PCR和Western blot检测靶基因survivin的mRNA和蛋白水平,采用双荧光素酶报告基因系统进行功能验证,应用细胞生长曲线、MTT实验、流式细胞术评价细胞生长、增殖和凋亡的变化及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和塞来昔布的敏感性.结果 TargetScan预测发现survivin是miR - 203的靶基因；转染miR - 203模拟物或表达质粒后,Real - time PCR与Western blot结果分别提示survivin的mRNA和蛋白水平下调(P＜0.05)；双荧光素酶报告分析技术证实抗凋亡基因survivin为miR - 203的直接靶点；细胞生长曲线结果显示miR - 203组的生长速度明显受抑(P＜0.05)；MTT实验表明miR - 203组的增殖能力减弱(P＜0.05)及药物敏感性增加；流式细胞术结果示miR -203组的凋亡比例明显升高(P＜0.01).结论 miR - 203在胶质瘤细胞中能靶向抑制survivin的表达,是一个抗增殖、促凋亡的miRNA,有可能作为今后胶质瘤干预治疗的新靶点.
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