探讨干预小鼠急性酒精性肝损伤细胞凋亡的时间窗

• 作 者: 魏红涛 薛晓伟 刘冰 杨立沛 王俐
• 机 构: 100050北京,首都医科大学北京友谊医院急诊科,100050北京,首都医科大学北京友谊医院急诊科,100050北京,首都医科大学北京友谊医院急诊科,100050北京,首都医科大学北京友谊医院急诊科,
• 出 处: 中华急诊医学杂志
• 发表日期: 2014年23期
• 关键词: Mice Acute alcoholic liver injury Apoptosis Proliferation T-ERK P-ERK PKC P-PKC

目的 建立小鼠急性酒精性肝损伤的模型,通过测定肝脏组织内的相关增殖凋亡蛋白的变化,探讨抑制其细胞凋亡的治疗时间窗,以指导临床治疗肝损伤.方法 将30只雄性KM种小鼠饲养于首都医科大学清洁级动物房,随机分为两组(随机数字法).对照组10只给予正常喂养,实验组20只,一次性给予50％乙醇(12 mL/kg)灌胃,分别在灌胃6h (m6h)和12 h(m12 h)两个时间点处死小鼠各10只.苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠肝脏组织病理学的变化.应用Western-blot的方法监测小鼠肝脏中蛋白T-ERK,P-ERK,PKC,P-PKC,caspase-3的含量变化.用SPSS 11.5统计软件对数据进行处理,进行方差分析,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 通过观察小鼠灌酒后的行为变化,结合形态学指标验证小鼠急性酒精性肝损伤的模型复制成功,小鼠无死亡,实验组小鼠出现嗜睡、行动迟缓等醉酒状态.实验组经酒精灌胃6h所测指标较对照组没有统计学意义,而经酒精灌胃12 h,肝小叶结构紊乱,肝细胞内脂肪空泡形成,与对照组比较,P-ERK和P-PKC显著降低[(2.41±0.38), (0.97±0.25),F=4.82,P＜0.05;(0.16±0.00),(0.08±0.01),F=29.63,P＜0.05],caspase-3显著升高[(0.30±0.02),(0.11±0.01),F=34.38,P＜0.05].结论 给予小鼠大剂量酒精灌胃后,凋亡主要集中在12 h出现,因此抑制小鼠急性酒精性肝损伤细胞凋亡的时间窗可能存在于6～12h之间。