【摘 要】
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目的探讨缺氧加重淀粉样β蛋白(Aβ)对神经细胞毒性作用的通路。 方法体外培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)，细胞分为对照组、Aβ干预组、缺氧组、Aβ干预＋缺氧组，采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中p21激活激酶1(PAK1)、LIM激酶(LIMK1)、cofilin mRNA表达水平，用免疫印迹(Western blot)检测细胞中PAK1、LIMK1、磷酸化LIMK
【机 构】
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目的探讨缺氧加重淀粉样β蛋白(Aβ)对神经细胞毒性作用的通路。
方法体外培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)，细胞分为对照组、Aβ干预组、缺氧组、Aβ干预＋缺氧组，采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中p21激活激酶1(PAK1)、LIM激酶(LIMK1)、cofilin mRNA表达水平，用免疫印迹(Western blot)检测细胞中PAK1、LIMK1、磷酸化LIMK1(P-LIMK1)、cofilin、磷酸化cofilin(P-cofilin)蛋白表达水平。
结果Aβ处理后，SH-SY5Y细胞的活力减少；与对照组比较，10 μmol/L Aβ干预SH-SY5Y细胞24 h后，PAK1、LIMK1、P-LIMK1、P-cofilin蛋白表达量减少(均P<0.05)，PAK1和LIMK1的mRNA表达减少(P<0.05)，cofilin蛋白和mRNA表达差异无统计学意义。10 μmol/L Aβ＋2%氧气干预条件下处理SH-SY5Y细胞24 h后，与Aβ干预组比较，PAK1、LIMK1、P-LIMK1、P-cofilin蛋白表达量减少(均P<0.05)，PAK1和LIMK1的mRNA表达减少，且差异有统计学意义(均P<0.05)，cofilin蛋白和mRNA表达差异无统计学意义。
结论Aβ可能通过抑制PAK1的活性来减少P-LIMK1，进而导致cofilin磷酸化减少，去磷酸化cofilin形成增多，导致神经元的损伤，缺氧通过该通路加重Aβ对神经细胞的毒性作用。
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