应用辣根过氧化物酶化学发光法检测毒素原性大肠杆菌方法的建立

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利用活化酶标复合物(HRP-PBQ-PEI^+-NH3^+)直接标记毒素原性大肠杆菌不耐热肠毒素(ETEC-LT)基因片段(0.8kb)作探讨。HRP在戊二醛作用下与单链靶DNA形成DNA和酶的共价复合物,与DNA探针结合的辣根过氧化物酶(HRP)催化相应的发光剂,经增强型化学发光反应(ECL)在普通X胶片上自显影(CPD)检测ETEC-LT。结果可检测到0.03pg的纯质粒DNA和10^3的ETEC菌细胞,dot blot杂交证明该酶标基因探针仅与产生LT肠毒素的ETEC杂交,其余均未见杂交阳性反应,结
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