【摘 要】
：
为了大量获得人乳头瘤病毒(HPV)16型的假病毒颗粒(PsV),将贴壁生长的293FT细胞驯化成为悬浮细胞系进行大规模的悬浮培养,同时优化假病毒纯化方法,并使用冷冻电镜解析其三维空
【机 构】
：
厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室,厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术中心,
论文部分内容阅读
为了大量获得人乳头瘤病毒(HPV)16型的假病毒颗粒(PsV),将贴壁生长的293FT细胞驯化成为悬浮细胞系进行大规模的悬浮培养,同时优化假病毒纯化方法,并使用冷冻电镜解析其三维空间结构。本研究通过逐步降低培养基中血清浓度和加入抗聚团剂等方法,获得了可在Wave生物反应器中大规模悬浮培养的293FT细胞,经过携有HPV16L1、L2基因和GFP报告基因的质粒转染,实现了大规模制备HPV16假病毒;利用CsCl等密度和蔗糖密度梯度超速离心的方法,获得高纯度的HPV16假病毒颗粒,滴度为8.2×10~5 TCID50/!L;蛋白印迹结果显示HPV16假病毒中含有L1和L2蛋白,定量ELISA测得L1蛋白的含量为156.0μg/mL;最后使用Tecnai G2F30冷冻电镜和Falcon电子直接探测相机采集冷冻HPV16假病毒的图像,应用AUTO3DEM软件解析其结构,结构分辨率为14,呈现为T=7的等二十面体对称结构,直径为600。本研究为HPV疫苗临床血清中和检测、高分辨率HPV16假病毒的结构解析及L1和L2相互作用研究奠定了良好基础。
其他文献
为了提高两栖空气动力艇在冰雪路面上的通过能力,设计了一种用于两栖空气动力艇的新型独立悬挂系统。在CATIA中建立独立悬挂系统的几何模型,通过CAD/CAE软件的数据接口技术将
纳税筹划是指在税法许可的范围内,对企业组建、经营、投资及筹资等活动进行的事先筹划与安排,使纳税人尽可能地减少税款的缴纳,从而获得税收利益的行为。针对房地产公司涉及
目的:探究早期综合康复治疗在骨质疏松性髋部骨折术后患者中的应用对其功能恢复的促进作用。方法:择取2014年2月-2016年3月我院收治的66例骨质疏松性髋部骨折术后患者作为此
<正>说到图书营销,一般都认为是出版社发行人员为了扩大图书发行量,通过一系列推介、宣传和造势活动而有计划有步骤地实施引导读者购买图书的行为。并且还认为图书营销策划是
本次营改增试点工作的全面推开,使得物业公司在日常经营管理及财税核算方面有着一定的变化,面对新税制改革物业公司如何应对、如何防范税务风险、如何通过必要的纳税筹划来降
<正> 疔毒“走黄”,病势急而重,近年来笔者以白胡椒外敷配合五味消毒饮治疗疔毒“走黄”24例,疗效较好,介绍于下:24例均证见:疔疮顶凹色黑,无脓,肿
里多运河是加拿大的历史运河之一,并在2007年入选世界文化遗产名录。里多运河的保护已经历了几十年发展,成为加拿大遗产河流保护重要探索,具有了典范意义。本文较为完整地研
<正>经过改革开放30多年的高速发展,中国民营企业已经完成了以捕捉市场机会、迅速扩张为主要内容的原始积累阶段,融入了经济全球化的大背景中。民营企业都面对着增长方式、资
运用中国经济增长率与失业率的数据,利用两种模型和两种时间序列趋势分解方法,对我国1980-2012年产出波动与失业率变化之间的关系进行了实证分析。结果表明:我国产出波动和失