【摘 要】
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目的 构建含有人脑源性神经营养因子(human brain-derived neurotrophic factor,hBDNF)的逆转录病毒载体pLXSN(hBDNF-pLXSN),鉴定hBDNF生物活性.方法 提取自愿捐献5月龄胎儿
【机 构】
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武警总医院口腔科,北京,100039;武警江西总队医院口腔科
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目的 构建含有人脑源性神经营养因子(human brain-derived neurotrophic factor,hBDNF)的逆转录病毒载体pLXSN(hBDNF-pLXSN),鉴定hBDNF生物活性.方法 提取自愿捐献5月龄胎儿脑组织基因组mRNA,应用RT-PCR技术获得hBDNF基因序列,体外构建hBDNF-pLXSN感染的成纤维细胞NIH/3T3.对其进行病毒滴度检测,采用免疫组织化学染色鉴定NIH/3T3细胞中hBDNF的表达.通过对PC12细胞和大鼠背根神经节的培养,分析hBDNF生物学活性.结果 测序结果表明成功构建了hBDNF-pLXSN.被感染的NIH/3T3细胞免疫组织化学染色显示胞浆中有hBDNF表达.hBDNF-pLXSN具有促进PC12细胞增殖的作用,并可以使培养的背根神经节长出神经突.结论 hBDNF-pLXSN病毒可以感染NIH/3T3细胞并使其表达和分泌具有生物学活性的hBDNF,可以作为面瘫基因治疗研究的工具.
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