【摘 要】
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目的 探讨在正常饮食状态下,CD36基因缺失对小鼠肌肉胰岛素信号通路的影响及作用机制.方法 野生型小鼠(WT)和CD36基因敲除小鼠(CD36-/-)给予正常饮食喂养14周(n=12).小鼠禁食4 h,腹腔注射胰岛素(1 U/kg)进行胰岛素耐量实验.Real-time PCR检测小鼠肌肉胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物1/2(IRS1/2)、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因表达.Western blot检测小鼠肌肉蛋白激酶B(AKT)、IR、IRS1/2和PTP1B的蛋白表达.免疫共沉淀(Co-
【机 构】
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重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室,重庆 400016
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目的 探讨在正常饮食状态下,CD36基因缺失对小鼠肌肉胰岛素信号通路的影响及作用机制.方法 野生型小鼠(WT)和CD36基因敲除小鼠(CD36-/-)给予正常饮食喂养14周(n=12).小鼠禁食4 h,腹腔注射胰岛素(1 U/kg)进行胰岛素耐量实验.Real-time PCR检测小鼠肌肉胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物1/2(IRS1/2)、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因表达.Western blot检测小鼠肌肉蛋白激酶B(AKT)、IR、IRS1/2和PTP1B的蛋白表达.免疫共沉淀(Co-IP)检测肌肉IR和IRS1的酪氨酸磷酸化程度.染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测肌肉PTP1B启动子组蛋白乙酰化水平.结果 在正常饮食状态下,与WT小鼠相比,CD36-/-小鼠的胰岛素耐量显著增强(P<0.05),血清胰岛素浓度升高(P<0.01),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)升高(P<0.05).在肌肉组织中,CD36-/-小鼠与WT小鼠相比,p-AKT/AKT蛋白表达比值显著降低(P0.05).Co-IP实验显示IR和IRS1的酪氨酸磷酸化水平在CD36-/-小鼠中显著降低(P<0.05).CD36-/-小鼠肌肉中PTP1B mRNA和蛋白表达均高于WT小鼠(P<0.05),ChIP实验显示PTP1B基因启动子的组蛋白乙酰化水平显著升高(P<0.01).腹腔注射PTP1B的抑制剂可改善CD36-/-小鼠的胰岛素敏感性.结论 在正常饮食条件下,CD36基因对于维持生理肌肉胰岛素敏感性十分重要,小鼠CD36基因缺失通过上调PTP1B基因表达,诱导IR、IRS1去酪氨酸磷酸化而使肌肉胰岛素信号传导受损.
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