可溶性人TNFR75的表达、纯化及活性鉴定

• 作 者: 袁栎 刘丽 等
• 机 构: 空军总医院空军分子生物学中心实验室
• 出 处: 中国生物化学与分子生物学报
• 发表日期: 2002年3期
• 关键词: 可溶性人TNFR75 表达 纯化 活性鉴定 肿瘤坏死因子受体 TNF recepter expression purification activity

将编码可溶性人TNFR75（shTNFR75)的cDNA与酵母整合载体pPICZαA重组，构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞GS115，获得了shTNFR75在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞，甲醇诱导的pPICZαA-shTNFR75/GS115重组酵母工程细胞培养上清，经CNBr活化的TNF-Sepharose4B亲和层析柱纯化，纯化产物纯度为92%；经Western印迹分析，可被TNFR75单克隆抗体特异性识别，分子量约为31kD；受体配体结合试验，shTNFR75纯化产物与rhTNFα和rhT