TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响

• 作 者: 朱显军 邓海军 叶耿泰 沈智勇 李风萍 郭伟洪 杨庆斌 刘浩
• 机 构: 南方医科大学南方医院普外科
• 出 处: 南方医科大学学报
• 发表日期: 2016年3期
• 关键词: TALEN技术 MYH9 细胞周期 细胞凋亡 transcription activator-like effector nuclease MYH9 gene
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划（863计划）（2012AA021103）, 公益性行业科研专项（201402015）, 国家科技支撑计划（2013BAI05B0503）, 广东省省级科技计划项目（2014A020212629）, 2015年南方医院院长基金（2015C020）, 高等学校博士学科点专项科研基金（20124433110010）, 国家临床重点专科建设项目~~

目的利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因,观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛Fast TALETMTALEN试剂盒说明书,设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性,成功挑取MYH9基因敲低单克隆株,并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除;MYH9基因敲低后,MGC803细胞周期受阻于G2/M期（P〈0.05）