含有增强型绿色荧光蛋白报告子的载体系统的构建

• 作 者: 姜伯乐 赵宇 刘建元 苏莉莉 刘娇 王爱勤 周琼 李素丽 陆
• 机 构: 广西大学生命科学与技术学院,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西大学农学院,广西大学动物繁殖研究所
• 出 处: 广西农业生物科学
• 发表日期: 2008年4期
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白 报告质粒 效应物 亚细胞定位 enhanced green fluorescent protein （ EGFP ） reporter p
• 基金项目: 广西自然科学基金项目（桂科青0728002）,广西大学科研基金项目（X071063）.

将增强型绿色荧光蛋白基因编码序列克隆到不含启动子的载体pLAFR6上，构建报告质粒pLZY。将野油菜黄单胞菌的已知效应物基因xopXccN启动子和分泌转运信号区序列克隆到pLZY，重组质粒导入野油菜黄单胞菌，阳性克隆细胞在荧光显微镜下呈现绿色荧光。阳性克隆接种萝卜叶片，在共聚焦激光扫描显微镜下检测观察到在植物细胞内发荧光，而含有pLZY的野油菜黄单胞菌对照菌株菌体和植物细胞内都检测不到绿色荧光，证明报告质粒pLZY工作正常。该报告质粒为研究目的基因在不同宿主中的表达和研究植物病原细菌Ⅲ型效应物蛋白的植物亚