PRRSVHN25株ORF5基因的克隆和重组腺病毒的构建

• 作 者: 于新友 沈志强 管宇 南松剑 王金良 肖跃强 唐娜
• 机 构: 山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心,山东省滨州畜牧兽医研究院
• 出 处: 畜牧与兽医
• 发表日期: 2010年1期
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 重组腺病毒
• 基金项目: 山东省自然科学基金项目（Y2006D26）.

克隆PRRSVHN25株ORF5基因，测序并进行序列分析。结果显示ORF5基因编码区长603bp，编码200个氨基酸，与国内外VR．2332株、LV株和CH-1a株ORF5基因的核酸序列同源性分别为99．0％，63．8％和91．4％，而推导的氨基酸序列同源性分别为98．0％，58．8％和90．5％。构建含ORF5基因的重组腺病毒穿梭质粒，PmeⅠ酶切线性化后，转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞，同源重组后筛选重组腺病毒质粒，经PacI酶切后转染293A细胞进行包装，获