负载碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白-12基因的兔脂肪干细胞向成纤维细胞分化的实验研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:computer2900
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、骨形态发生蛋白(BMP)-12基因序贯转染兔脂肪干细胞向成纤维细胞分化的可能性。方法:2017年1月至2018年12月,原代培养兔脂肪干细胞(取自新西兰大耳兔颈背部皮下脂肪),细胞表面抗原CD44、CD49d、CD106检测结合成骨细胞诱导分化对培养的细胞进行鉴定,脂质体介导的方法序贯转染BMP-12和bFGF基因,蛋白质印迹法(Western blot)检测目的基因BMP-12和bFGF蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染细胞Ⅰ型胶原和弹性蛋白RNA的表达情况。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(n ±n s)表示,应用单因素方差分析比较组间差异。n 结果:兔脂肪组织中分离出来的脂肪间充质干细胞(ADSCs) CD44、CD49d表达阳性,CD106表达呈阴性。Western blot检测筛选后的ADSCs稳定表达BMP-12(0.229±0.005)和bFGF(0.208±0.019)蛋白(n F=120.221,n P<0.05),差异有统计学意义。双基因转染的ADSCsⅠ型胶原(2.250±0.007,n F=340.103,n P<0.05)和弹性蛋白(1.807±0.008,n F=107.314,n P<0.05)的mRNA表达最高,差异均有统计学意义。n 结论:pcDNA3.1+绿色荧光蛋白(GFP)-BMP-12和pcDNA3.1+红色荧光蛋白(RFP)-bFGF可以促进ADSCs向成纤维细胞分化,可能在组织工程技术修复韧带损伤中具有重要作用。“,”Objective:To investigate the possibility of basic fibroblast growth factor (bFGF) and bone morphogenetic protein (BMP)-12 genes into rabbit adipose stem cells to differentiate into fibroblasts.Methods:The study was conducted from January 2017 to December 2018. The cells were derived from subcutaneous fat in the neck and back of the New Zealand big-eared rabbits. Rabbit adipose-derived stem cells (ADSCs) were cultured, and CD44, CD49d and CD106 were used to identify the cultured cells. Liposome was used to sequentially transfect BMP-12 and bFGF genes. Western blotting was used to detect the protein expression of BMP-12 and bFGF. Real time-PCR assay was used to detect the mRNA expression of type Ⅰ collagen and elastin. One-way ANOVA was used to compare the differences among the groups. n P<0.05 was considered statistically significant.n Results:The ADSCs isolated from rabbit adipose tissue were positive for CD44 and CD49d while negative for CD106. The expression of BMP-12 (0.229±0.005) and bFGF (0.208±0.019) proteins was stable in the selected ADSCs (n F=120.221, n P<0.05). The mRNA expression of type Ⅰ collagen (2.250±0.007,n F=340.103, n P<0.05) and elastin (1.807±0.008,n F=107.314, n P<0.05) in ADSCs transfected with two genes was the highest and the difference was statistically significant.n Conclusion:PcDNA3.1+ green fluorescent protein (GFP)-BMP-12 and pcDNA3.1+ red fluorescence protein (RFP)-bFGF could promote the differentiation of ADSCs into fibroblasts, which may play an important role in tissue engineering to repair ligament damage.
其他文献
本文试图分析的柬埔寨青年出家仪式,并以此呈现当地社会中,延续历史上印度教传统的祭司,柬埔寨语称为“阿加”,即老师之意,他们所参与的仪式步骤及其蕴含的一整套印度教对于生命的
羽毛球决赛后,记者看到张宁手上捧着一束鲜花,羽毛球前国手龚睿娜透露,这是张宁丈夫于洋送的。定情源于一碗“方便面”1987年,12岁的张宁与早自己一年进队的于洋在辽宁省体校
  四臂观音是藏传佛教造像艺术主要内容之一,历代藏族艺术家以唐卡、壁画、塑像、石刻、擦擦擦等多种艺术形式使四臂观音形象得以展现。目前,不仅在藏区寺庙殿堂中存有大量的
本文简述了科普演讲者的行动动力——为了提高国民科学素质,介绍了中国科学院老科学家科普演讲团实行的“精品战略”取得成效,同时表明作为科普演讲者不仅要积极应对互动环节,又
英国一名昏迷70 年的老人菲利浦·莱 瑟日前去世,享年82 岁。上个世纪20年代, 数千人死于一种名为 Philip Sleitz, a 70-year-old man who died in the United Kingdom, die
知名爱国人士,黄埔军校同学会副会长,全国政协文史资料委员会专员沈策同志,因病于2005年10月22日18时06分在北京逝世,享年98岁。沈策同志1907年生于浙江仙居县下沈村。1928年
  在当今以经济建设为中心的社会大背景下,藏族地区开始发生前所未有的社会大变迁。主要是以市场经济拉动了藏区社会的全面发展,同时,生态旅游又成为许多藏族地区的支柱产业。
科学技术是人类文明进步的基本内容和重要杠杆,而科技新闻传播作为传递科学技术知识的大众传播方式,承担着公众科学素养普及和科技创新成果转化等重要功能.本文将政府作为一
以激发人们创新的兴趣,提高全社会的创新意识和公民科学素养为目标的现代科技传播在促进社会发展中发挥着不可替代的作用.然而,在科学功利主义等因素的驱使下,出现了虚假科技
近年来,温室葡萄在乐亭县已有较大发展。为实现温室葡萄的高产高效,我县在抓好栽培技术的同时,重点推广了温湿度调控技术。此项技术的推广使温室葡萄,667m2可获效益44300元左右。