利用合适的启动子提高外源基因在Jurkat细胞中的表达

• 作 者: 袁娟 牟宗春 游佳 马维骏
• 机 构: 上海交通大学医学院,中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所
• 出 处: 中国医药生物技术
• 发表日期: 2012年4期
• 关键词: JURKAT细胞 启动区(遗传学) 基因报告 萤光素酶类 Jurkat cells Promoter regions （Genetics） Genes re

目的通过选择合适的启动子来实现外源基因在Jurkat细胞中的高效表达。方法以pGL3-MCS质粒为基础构建不同启动子（SV40、CMV、EFlα和UbC）驱动萤火虫荧光素酶Fluc报告基因表达的重组质粒，并将其与作为内参的表达海肾荧光素酶Rluc报告基因的质粒共转Jurkat细胞，检测Jurkat细胞中这两种荧光素酶与相应底物反应所产生的荧光强度，计算Fluc与Rluc荧光强度的比值即Fluc的相对酶活，通过比较Fluc相对酶活的大小来选取在Jurkat细胞中具有高表达活性的启动子。结果以pGL3-MCS