【摘 要】
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妊娠期用药不可避免,如何帮助孕妇合理用药以减少自发流产、早产和低体重儿的发生,对于医务工作者至关重要.本研究建立了药物流产毒性的检测模型,可筛除疑似流产的药物,避免
【机 构】
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河南省生殖健康科学技术研究院,国家卫健委出生缺陷预防重点实验室,河南省人口缺陷干预技术研究重点实验室,河南郑州450002;河南大学护理与健康学院,河南开封475000;漯河医学高等专科学校,河南漯河
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妊娠期用药不可避免,如何帮助孕妇合理用药以减少自发流产、早产和低体重儿的发生,对于医务工作者至关重要.本研究建立了药物流产毒性的检测模型,可筛除疑似流产的药物,避免用药不当导致的孕妇流产.通过三维悬浮培养诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)的方式,诱导其形成拟胚体(embryoid bodies,EBs)和类皮质器官,在体外模拟早期胚胎从内细胞团向三胚层体系的分化过程.根据流产药物米非司酮(RU486)暴露浓度的不同,随机将EBs分为3组:空白对照组(control)、低浓度组(L-RU486,10 μg·mL1)和高浓度组(H-RU486,20 μg·mL-1).借助末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法[terminal dexynucleotidyl trans-ferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL]和免疫荧光染色等技术观察第5、8和11天的不同组别EBs的大小、细胞凋亡和胚层分化的情况.研究结果表明:iPSCs体外可聚集成三维结构的EBs,在特异性神经诱导因子作用下,EBs外周分化出神经玫瑰花状结构,形成大脑皮质类器官;米非司酮暴露导致EBs发育迟缓,EBs直径减少(P＜0.01),促进EBs内部细胞凋亡(P＜0.01),并影响EBs胚层发育,抑制胚胎干细胞增殖和外胚层细胞分化(P＜0.01),促进中胚层细胞发育(P＜0.05).本研究提示,iPSCs可作为药物流产毒性的筛选模型,而EBs的大小、细胞凋亡率和胚层细胞分化率可作为药物筛选的评价指标.
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