【摘 要】
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目的 不同强度和持续时间下FGF信号的生物效应可能不同,探讨FGF信号持续增强对体外培养小鼠骺板生长的影响及可能机制.方法 取胚胎期15 d的C57BL/6J小鼠掌骨建立体外培养模型
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院骨科,重庆,400010;第三军医大学大坪医院创伤中心
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目的 不同强度和持续时间下FGF信号的生物效应可能不同,探讨FGF信号持续增强对体外培养小鼠骺板生长的影响及可能机制.方法 取胚胎期15 d的C57BL/6J小鼠掌骨建立体外培养模型,分为3组(各40只掌骨).对照组加入0.1%DMSO,bFGF组加入100 μg/L bFGF和0.1%DMSO,PD98059组加入100μg/L bFGF和50μmol/L PD98059(含0.1% DMSO).培养6 d后用Calcein溶液对掌骨的钙化组织染色,测量其总长度(total length,TL)和钙化组织长度(ossified tissue length,OSL)的增加百分率.培养7 d提取骺板软骨细胞的RNA,实时荧光定量PCR仪检测Ⅱ型胶原(collagen type Ⅱ,Col Ⅱ)、Col Ⅹ、Ihh(Indian hedgehog)基因表达的变化.结果 胚胎小鼠的掌骨在体外培养条件下继续生长发育.培养6d后,bFGF组掌骨TL增加百分率与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),OSL增加百分率显著小于对照组(P＜0.05);PD98059组掌骨TL增加百分率和OSL增加百分率与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05),但均较bFGF组显著提高(P＜0.05).培养7 d,bFGF组Ihh、Col Ⅱ和Col Ⅹ基因表达的相对含量均较对照组显著降低(P＜0.05);PD98059组Col Ⅱ和Col Ⅹ基因表达的相对含量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但显著高于bFGF组(P＜0.05),Ihh基因表达的相对含量均显著高于对照组和bFGF组(P＜0.05).结论 持续的FGF信号增强可能通过Ihh下调来影响Col Ⅱ和Col Ⅹ表达,使体外培养的骺板生长迟滞.细胞外信号调节激酶信号通路可能在上述机制中发挥重要作用.
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