乙肝病毒S抗原和preS1抗原表位融合蛋白(S/preS1)在CHO细胞中的稳定高效表达

• 作 者: 杨振西 李世崇 刘红 张苗 叶玲玲 吴彦卓 徐明波 陈昭烈
• 机 构: 安徽大学生命科学学院,军事医学科学院生物工程研究所,北京双鹭药业股份有限公司,
• 出 处: 生物工程学报
• 发表日期: 2013年12期
• 关键词: 乙肝病毒表面抗原 PreS1抗原表位 疫苗 CHO细胞 表达

含前S蛋白的重组乙型肝炎疫苗是第3代乙肝疫苗研发的重点,有望替代现在广泛使用的基因工程疫苗。构建表达乙肝病毒S抗原和preS1抗原表位(21-47位氨基酸)融合蛋白(S/preS1)的真核表达载体HMRCHEF53u/Neo-S/preS1并转染CHO-S细胞,经ELISA和有限稀释克隆筛选获得了S/preS1表达效率高、体外培养生物学性状好的CHO细胞系10G6。Western blotting分析证实10G6表达的S/preS1同时保留S和preS1的天然免疫原性。10G6细胞在以活细胞密度和preS1/S浓度为评价指标的连续批次培养过程中保持着稳定的目的产物表达效率和良好的生长特性。采用无血清流加培养工艺,10G6细胞的活细胞密度和preS1/S浓度分别达到7×106~10×106 cells/mL和17~20 mg/L。