【摘 要】
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目的探讨熊果酸对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖以及凋亡的影响,分析其作用机制。方法取人骨肉瘤细胞株U2-OS分为4组,分别采用浓度为0、10、20、40μmol/L的熊果酸进行培养。培养0、
【机 构】
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吉水县人民医院骨科,南昌大学第二附属医院骨科,
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目的探讨熊果酸对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖以及凋亡的影响,分析其作用机制。方法取人骨肉瘤细胞株U2-OS分为4组,分别采用浓度为0、10、20、40μmol/L的熊果酸进行培养。培养0、24、48、72 h,应用细胞计数试剂盒8（cell counting kit 8,CCK-8）检测细胞增殖能力变化;培养48 h,使用流式细胞术测定熊果酸对骨肉瘤细胞周期和凋亡的影响,应用实时荧光定量PCR和Western blot检测周期蛋白cyclin D1的表达和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达和活化情况。结果 CCK-8检测示,培养0、24 h时各组吸光度（A）值比较,差异无统计学意义（P>0.05）;48、72 h时随浓度增加A值逐渐减小,各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术检测示,随熊果酸浓度增加,U2-OS细胞的G1期增加、S期及G2/M期减少,细胞凋亡率逐渐增加,各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。与0μmol/L组相比,10、20、40μmol/L组cyclin D1 m RNA及蛋白相对表达量下调（P<0.05）;各组间Caspase-3 m RNA相对表达量比较差异无统计学意义（P>0.05）;但随熊果酸浓度增加,Caspase-3前体蛋白下降,活化的Caspase-3增加,各组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论熊果酸能有效抑制U2-OS细胞增殖,诱导cyclin D1表达下调导致细胞在G0/G1期阻滞,同时使Caspase-3活化增加进而促进细胞凋亡。
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