【摘 要】
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目的研究水通道蛋白3(aquaporin-3,AQP-3)在高渗透压诱导的大鼠髓核细胞(rat nucleus pulposus)凋亡中的作用。方法体外培养的大鼠髓核细胞,按330、550mOsm/kg的渗透压分组,CCK-8检
【机 构】
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陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院骨科; 重庆医科大学附属第三医院(捷尔医疗)骨与创伤中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81772378);陆军军医大学第一附属医院基础研究军民融合项目(SWH2017YBXM-20)
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目的研究水通道蛋白3(aquaporin-3,AQP-3)在高渗透压诱导的大鼠髓核细胞(rat nucleus pulposus)凋亡中的作用。方法体外培养的大鼠髓核细胞,按330、550mOsm/kg的渗透压分组,CCK-8检测髓核细胞增殖,流式细胞分析细胞凋亡率,Western blot和定量PCR检测凋亡相关分子Bcl-2、Bax和caspase3表达情况;使用免疫细胞化学、Western blot和定量PCR检测AQP-3的表达。利用过表达慢病毒提高AQP-3的表达,进一步观察AQP-3对高渗环境诱导凋亡的影响。结果相比于330mOsm/kg渗透压,550mOsm/kg高渗环境中髓核细胞24、48、72h细胞增殖显著降低,髓核细胞凋亡率显著增加(P<0.05),蛋白和mRNA表达结果显示Bcl-2表达明显降低(P<0.05),Bax和cleaved caspase3/caspase 3表达明显增加(P<0.05)。相比于高渗环境中的空白对照髓核细胞,AQP-3过表达髓核细胞的凋亡率显著降低(P<0.05),蛋白和mRNA表达结果显示Bcl-2表达明显增加(P<0.05),Bax和cleaved caspase3/caspase 3表达明显降低(P<0.05)。结论高渗透压显著促进髓核细胞的凋亡并降低AQP-3的表达;过表达AQP-3可缓解高渗透压环境下髓核细胞凋亡。
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