p16β基因重组腺病毒质粒的构建及对喉癌细胞的作用

• 作 者: 范敏 鲜均明 周光耀 梁传余 刘世喜
• 机 构: 成都市第七人民医院耳鼻咽喉科,四川大学华西医院耳鼻咽喉科
• 出 处: 四川大学学报(医学版)
• 发表日期: 2006年4期
• 关键词: p16β基因 细胞周期信号传导 喉癌 重组腺病毒 Signal conduction Recombinant adenovirus Laryngeal squa

目的探讨野生型p16β对体外喉癌Hep-2细胞周期信号传导的干预作用。方法以重组腺病毒为载体，构建p16β的重组腺病毒AdEasy-GFP-p16β质粒，并在293细胞中包装、纯化。将已纯化的重组腺病毒AdEasy-GFP-p16β在体外转染Hep-2喉癌细胞，采用MTT实验、流式细胞术（FCM）、免疫组化、Western blot等实验手段检测Hep-2细胞的抑制／杀伤作用及其细胞周期信号、DNA含量、细胞凋亡率的变化；检测P16蛋白的表达和Hep-2细胞的超微结构变化。结果本研究成功地构建和制备了高滴