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[目的]探索DNA条形码技术在实蝇快速鉴定中的应用.[方法]利用DNA条形码技术和BOLD系统,选取线粒体细胞色素氧化酶I(COI)基因片段,针对截获入境旅客非法携带的番石榴中实蝇幼虫进行序列测定、比对和分析,并对培养后的成虫进行形态学分类从而验证分子分类的结果.[结果]检测的11头实蝇幼虫全部鉴定为橘小实蝇[Bactrocera dorsalis (Hendel)].[结论]为河北出入境检疫部门初步探索DNA条形码技术在实蝇快速鉴定中的应用及提升检疫工作的时效性奠定了技术基础.