【摘 要】
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目的:探讨耳聋左慈丸对miR-34a转染HEI-OC1听细胞自噬和凋亡的影响.方法:应用miR-34a模拟物、miR-34a模拟物阴性对照和miR-34a抑制物转染HEI-OC1听细胞,再用10、20、50 μg/mL耳聋左慈丸作用于miR-34a模拟物组.采用qPCR检测miR-34a的表达,CCK8法观察细胞存活率,Western Blot检测SIRT1、Ac-p53及自噬、凋亡相关蛋白的表达.结果:与miR-34a模拟物组比较,耳聋左慈丸显著降低miR-34a的表达水平(P＜0.01),抑制miR-
【机 构】
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上海中医药大学教学实验中心,上海201203
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目的:探讨耳聋左慈丸对miR-34a转染HEI-OC1听细胞自噬和凋亡的影响.方法:应用miR-34a模拟物、miR-34a模拟物阴性对照和miR-34a抑制物转染HEI-OC1听细胞,再用10、20、50 μg/mL耳聋左慈丸作用于miR-34a模拟物组.采用qPCR检测miR-34a的表达,CCK8法观察细胞存活率,Western Blot检测SIRT1、Ac-p53及自噬、凋亡相关蛋白的表达.结果:与miR-34a模拟物组比较,耳聋左慈丸显著降低miR-34a的表达水平(P＜0.01),抑制miR-34a过表达造成的HEI-OC1听细胞存活率的下降(P＜0.01).miR-34a模拟物组SIRT1蛋白表达显著降低(P＜0.01),Ac-p53蛋白表达升高(P＜0.01);自噬相关蛋白LC3 Ⅱ、p62表达增加(P＜0.05,P＜0.01),凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3与capsase3的比值升高(P＜0.01).50 μg/mL耳聋左慈丸处理后,SIRT1蛋白表达显著升高(P＜0.01),Ac-p53蛋白表达显著降低(P＜0.01),LC3 Ⅱ和p62蛋白表达以及cleaved caspase-3与capsase-3比值均显著下降(P＜0.01,P＜0.05).结论:耳聋左慈丸可通过抑制miR-34a的表达调节SIRT1/p53信号通路,调控细胞自噬和凋亡,对HEI-OC1细胞起到保护作用.
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