厌氧颗粒污泥PCR-DGGE图谱的优化研究

• 作 者: 王宁 刘永红 李佳凤 徐新生 孙飞龙 延卫
• 机 构: 西安工程大学环境与工程学院,北方特种能源集团西安庆华公司军用热电池中心,西安交通大学能源与动力工程学院
• 出 处: 中国沼气
• 发表日期: 2014年3期
• 关键词: PCR-DGGE 厌氧颗粒污泥 16S RDNA 古菌 细菌 PCR-DGGE anaerobic granular sludge 15S rDNA ar
• 基金项目: 国家自然科学基金（21176197,51308453）,国家科技重大专项（2009ZX07212-002-002）,陕西省科技统筹创新工程计划（2011KTZB03-03-01）,陕西省教育厅专项科研计划项目（12JK0831）

旨在为厌氧颗粒污泥微生物多样性研究的开展提供指导，实验以处理果汁废水的厌氧颗粒污泥为研究对象，对PCR—DGGE实验条件进行了优化研究。结果表明：1）采用巢式PCR对厌氧颗粒污泥内细菌与古菌进行扩增，古菌第二轮扩增时退火温度58℃，延伸时间408得到的PCR产物可满足DGGE的要求；2）古菌与细菌的DGGE最优变性剂梯度分别为40％-60％和30％～45％，电泳条件均为80V，16h；3）改进的强碱硝酸银染色法为高效低污染的染色方法。