基于LAMP法快速检测天花病毒

• 作 者: 冯龙斐 杜冰 黄滢洁 曹杨 陈璐萍 梁新红 李环 袁静
• 机 构: 河南科技学院食品学院，新乡 453003,北京城市学院 100071,河南科技学院食品学院，新乡 453003,中国人民解放军疾病预防控制中心，北京 100071,中国人民解放军疾病预防控制中心，北京
• 出 处: 中华实验和临床病毒学杂志
• 发表日期: 2019年33期
• 关键词: 天花病毒 环介导等温扩增技术 快速检测

目的

建立天花病毒(Variola)环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)快速检测方法，并进行温度优化，从灵敏度、特异性等方面进行评价。

方法

基于天花病毒的HA基因特异序列片段，设计5套引物。通过引物筛选及温度的优化，建立天花病毒的LAMP检测法，并对此方法的灵敏度、特异性进行评价。

结果

LAMP法快速检测天花病毒在63 ℃条件下60 min内完成，该方法的检测灵敏度是PCR的10倍，即LAMP灵敏度为3.37×10⁵拷贝/μl，PCR灵敏度为3.37×10⁶拷贝/μl。对痘病毒和腺病毒两种非天花病原结果呈阴性，表明引物设计具有良好的特异性。

结论

本方法用于快速检测天花病毒，具有操作简单、装置简便，灵敏度高、特异性强的特点，适合广泛应用于大批量样本初筛及基层单位现场检测天花病毒。