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目的 探讨环境毒素诱发蛋白水解应激在多巴胺能神经元变性死亡中的作用.方法 6-羟多巴(6-OHDA)、1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)、鱼藤酮作用于神经生长因子诱导的PC12细胞,MTT法检测各种药物的神经毒性作用,应用共聚焦免疫荧光双标染色观察药物处理后细胞内α-突触核蛋白及泛素化蛋白的表达及聚集.荧光分光光度计测量各组细胞蛋白酶体中各蛋白水解酶活性的变化.结果 3种神经诱变剂处理PC12细胞后,细胞活力呈浓度依赖性下降,其中6-OHDA 100 μmol/L、MPP+75μmol/L、鱼藤酮20 nmol/L作用24 h使细胞活力分别下降52%、44%、40%(P＜0.01).共聚焦显微镜观察显示药物处理后细胞胞质内α-突触核蛋白及泛素表达上调,并形成蛋白颗粒物.酶活性测定提示MPP+75μmol/L、鱼藤酮20 nmol/L处理使胰蛋白酶,糜蛋白酶及PgH水解酶活性明显下降(P＜0.05),而6-OHDA 100 μmol/L处理使细胞蛋白酶水解能力轻度降低,差异无统计学意义(P＞0.05),6-OHDA 200 μmol/L则诱导3种蛋白酶活性进一步下降,荧光指数分别为7.23±0.58,79.60±2.73和4.23±0.49(正常组为13.90±1.75,99.30±5.23和6.90±0.60,P＜0.01).结论 神经诱变剂可导致多巴胺能神经元泛素蛋白酶体功能失调及α-突触核蛋白和泛素化蛋白的积聚,诱发蛋白水解应激异常状态。