【摘 要】
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以PD-1分子为靶点,以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞为宿主,构建高表达抗PD-1单克隆抗体的细胞株,优化细胞株筛选工艺,优化工艺参数,得到稳定高表达PD-1细胞株。运用悬浮细胞CHO表达
【机 构】
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以PD-1分子为靶点,以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞为宿主,构建高表达抗PD-1单克隆抗体的细胞株,优化细胞株筛选工艺,优化工艺参数,得到稳定高表达PD-1细胞株。运用悬浮细胞CHO表达抗PD-1的抗体,首先在质粒构建中,将重链和轻链插到同一个载体上,保证了重链和轻链的比例为1∶1,实现共表达,轻重链在一个载体上,再同PD-1基因共转染,对后面的基因扩增筛选提供基础。采用悬浮培养,使用化学成分确定的培养基CD培养基,支持重组CHO细胞的生长,达到高密度培养,从而得到高表达蛋白。结果表明蛋白表达量稳定性分析表
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