湖北钉螺硫氧还蛋白过氧化物酶全长基因克隆、表达与蛋白活性分析

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:delphiall
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目的克隆湖北钉螺(Oncomelaniahupensis)硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)全长基因cDNA,并分析其表达蛋白的抗氧化活性。方法抽提人工饲养的阴性湖北钉螺总RNA,采用逆转录PCR方法扩增TPx基因片段。使用快速扩增cDNA末端法(RACE)扩增TPx基因,获得全长基因cDNA,与质粒pGEM.Teasy连接后,转化大肠埃希菌(E.coli)DH5α,筛选、测序,并进行生物信息学分析。克隆质粒pGEM-Teasy/FPx和表达载体pET28a经双酶切后连接,构建重组表达质粒pET28a/TPx
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